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產(chǎn)品詳情
操作說(shuō)明
注意事項(xiàng)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
本公司生產(chǎn)的BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒是根據(jù)目前廣泛應(yīng)用的蛋白濃度檢測(cè)方法之一BCA法研制而成。其操作簡(jiǎn)單，靈敏度高，所形成的顏色復(fù)合物穩(wěn)定性佳，受干擾物質(zhì)影響小?？蓹z測(cè)濃度下限達(dá)25 μg/mL的蛋白樣品，最小檢測(cè)蛋白量達(dá)到0.5 μg，待測(cè)樣品體積為1-20 μL。 本產(chǎn)品主要成分為：BCA二鈉鹽，無(wú)水碳酸鈉，酒石酸鉀，氫氧化鈉，碳酸氫鈉和硫酸銅。
包裝內(nèi)容：
| 產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
| G2026-1 | BCA試劑 | 40 mL/100 mL×2 |
| G2026-2 | 硫酸銅溶液 | 1.2 mL/1.2 mL×5 |
| G2026-3 | 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品（BSA）（4℃） | 25 mg/25 mg×5 |
| G2026-4 | 蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液 | 1.5 mL/1.5 mL×5 |
保存條件：
蛋白標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存，溶解后應(yīng)放-20℃保存。其余試劑常溫保存。有效期12個(gè)月。
使用方法：
1.取1 mL蛋白標(biāo)準(zhǔn)配置液加入到25 mgBSA的蛋白標(biāo)準(zhǔn)管中，完全溶解蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，即為25 mg/mL的蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液。配制成的蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液可-20℃長(zhǎng)期保存。
2.取適量25 mg/mL蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液，稀釋至終濃度為0.5 mg/mL。標(biāo)準(zhǔn)品最好與蛋白樣品用同樣的溶液稀釋。但為了簡(jiǎn)便起見(jiàn)，通常使用0.9% NaCl或PBS稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
3.做標(biāo)準(zhǔn)曲線。將標(biāo)準(zhǔn)品按0，1，2，4，8，12，16，20μL加到96孔板中，不足20 μL的加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)足到20 μL。
4.將待測(cè)的蛋白樣品稀釋至合適濃度，加到96孔板中，使待測(cè)樣品總體積也為20 μL。
5.根據(jù)樣品數(shù)量，按50體積BCA試劑加1體積硫酸銅溶液(50：1)配制適量BCA工作液，充分混勻。BCA工作液室溫24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。
6.每孔加入BCA工作液200 μL，充分混勻(可將酶標(biāo)板放在振蕩器上振蕩30s)，37℃放置30 min后，以標(biāo)準(zhǔn)曲線0號(hào)做參比，在562nm波長(zhǎng)下比色測(cè)定，記錄各孔吸光度值。(注：也可以在室溫放置2 h，或60℃放置30 min。如果蛋白濃度較低，最好放在60℃條件下反應(yīng)。)
7.以標(biāo)準(zhǔn)品蛋白含量(μg)為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)所測(cè)樣品的吸光值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上即可查得相應(yīng)的蛋白含量(μg)，除以樣品稀釋液總體積(20 μL)，乘以樣品稀釋倍數(shù)即為樣品實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng)：
1.BCA法測(cè)定蛋白濃度受溫度和時(shí)間的影響較大，吸光度值會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)不斷升高，且顯色反應(yīng)會(huì)因溫度的升高而加快。如果不能精確控制顯色反應(yīng)的時(shí)間和溫度，建議每次測(cè)定都需要做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2.本試劑也適用與分光光度計(jì)測(cè)定，但需要根據(jù)測(cè)定的最小體積調(diào)整樣品和BCA工作液的用量。
3.為保證蛋白的精確定量，樣品的提取和標(biāo)準(zhǔn)蛋白的配制最好選用相同的緩沖液，同時(shí)也要保證兩者檢測(cè)條件的一致性。如果緩沖液本身就有較高的背景值，建議使用其他的方法測(cè)定。
4.BCA法測(cè)定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響，可以兼容樣品中高達(dá)5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20，Tween 60，Tween 80。但在樣品含有脂類物質(zhì)時(shí)將明顯提高吸光度值。且受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響，需確保EDTA低于10mM，無(wú)EGTA，二硫蘇糖醇或β-巰基乙醇低于1mM。不適用BCA法時(shí)建議使用其他方法測(cè)定。
凡合肥萬(wàn)物生物科技有限公司銷售的產(chǎn)品均有嚴(yán)格的質(zhì)量保證。如發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品存在包裝規(guī)格疑問(wèn)，請(qǐng)于收貨之日起七日內(nèi)向我公司總部或當(dāng)?shù)剞k事處提出，并請(qǐng)保證該產(chǎn)品，以備本公司進(jìn)行核對(duì)檢驗(yàn)。如果發(fā)現(xiàn)有質(zhì)量問(wèn)題，請(qǐng)于收貨后一月內(nèi)保留產(chǎn)品50%以上的量，以便本公司回收產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)檢，確認(rèn)產(chǎn)品質(zhì)量。如逾期，則視為已經(jīng)對(duì)本公司產(chǎn)品進(jìn)行驗(yàn)收。 聲明：如發(fā)生產(chǎn)品索賠事宜，本公司僅在產(chǎn)品價(jià)格范圍內(nèi)酌情賠償，恕不接受超出產(chǎn)品價(jià)格范圍之賠償?？蛻粼谑褂眠^(guò)程中有任何技術(shù)問(wèn)題可以撥打技術(shù)售后服務(wù)電話我們隨時(shí)給予解答。
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