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產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 |
產(chǎn)品編號 |
規(guī)格 |
聚凝胺(10 mg/mL) |
FKU0113 |
1 mL |
產(chǎn)品描述
聚凝胺(Polybrene)也稱Hexadimethrine Bromide (海美溴銨),是一類多聚陽離子聚合物,常用于哺乳動物細(xì)胞的DNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)以增強(qiáng)脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染效率。溶解后帶正電,可與細(xì)胞表面陰離子結(jié)合,顯著提高病毒對細(xì)胞的感染效率,因此聚凝胺常用于慢病毒、腺病毒等病毒介導(dǎo)的哺乳動物細(xì)胞感染。其作用機(jī)理可能是:通過中和細(xì)胞表面唾液酸與病毒顆粒之間的靜電排斥從而促進(jìn)吸附作用。聚凝胺也是一種有名的抗肝素劑(肝素拮抗劑),常用來生產(chǎn)非特異性凝集的紅細(xì)胞。另外聚凝胺也多用于蛋白測序,因?yàn)樾┝康木勰吩谧詣訙y序分析可明顯改善多肽的降解現(xiàn)象。PVDF膜加入聚凝胺還能提高膜的親和性。本產(chǎn)品以溶液形式提供,濃度為10 mg/mL,無菌,無內(nèi),可直接使用。
儲存與運(yùn)輸
冰袋(wet ice)運(yùn)輸;4℃保存,12個(gè)月有效;-20℃保存,24個(gè)月有效。
試劑盒組成
Component |
G1803 |
聚凝胺(10 mg/mL) |
1 mL |
產(chǎn)品說明書 |
1 份 |
操作步驟
1. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,提前將細(xì)胞種植于孔板中,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜;
2. 參考相關(guān)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)所得MOI值,用完全培養(yǎng)基稀釋病毒原液到所需濃度,并添加聚凝胺(10 mg/mL),使聚凝胺最終濃度在2-12 μg/mL(聚凝胺最常用濃度為5-8 μg/mL);
3. 吸除原有的培養(yǎng)基,將病毒液-培養(yǎng)基-聚凝胺混合液加入到孔板中,輕輕搖勻后,于培養(yǎng)箱中孵育;
4. 孵育6-16 h后,吸除含病毒的培養(yǎng)基,更換為正常的培養(yǎng)基,于培養(yǎng)中繼續(xù)培養(yǎng)(病毒孵育的時(shí)間根據(jù)具體情況而定,如細(xì)胞狀態(tài)良好,可適當(dāng)延長孵育時(shí)間;反之,則需要提前更換為正常培養(yǎng)基);
5. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,培養(yǎng)一定時(shí)間后,對細(xì)胞進(jìn)行收集或檢測。
注意事項(xiàng)
1. 不同細(xì)胞對聚凝胺的敏感性不同,初次實(shí)驗(yàn),建議先做細(xì)胞毒性檢測。
2. 如-20°存放,建議適當(dāng)分裝,避免反復(fù)凍融。
3. 為了您的健康和安全,操作時(shí)請穿好實(shí)驗(yàn)服、戴好手套。
本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!
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